ZFTool
Cuantificación da proliferación de células canceríxenas en peixe cebra
ZFTool é unha caixa de ferramentas para a cuantificación da proliferación celular in vivo do peixe cebra mediante métodos de procesamento de imaxes.
Se utiliza ZFTool, cite este artigo: Carreira MJ, Vila-Blanco N, Cabezas-Sainz P, Sánchez L. ZFTool: A Software for Automatic Quantification of Cancer Cell Mass Evolution in Zebrafish. Applied Sciences. 2021; 11(16):7721. https://doi.org/10.3390/app11167721
Inxéctase aos peixes cebra unha proteína de fluorescencia verde (GFP) para visualizar a masa tumoral.
ZFTool elimina a autofluorescencia do peixe cebra mediante o cálculo da área con diferentes limiares de intensidade e o cálculo automático do limiar de autofluorescencia, que se establece para ambas as imaxes, a 0 hpi e ás 24-48-72 hpi (hpi=horas post-inxección), respectivamente. A continuación, ZFTool calcula a área da masa tumoral e a intensidade media de ambas as imaxes e determina o índice de proliferación.
O peixe cebra (Danio rerio) é un organismo modelo que se consolidou como ferramenta para a investigación do cancro, que é a segunda causa de morte máis común despois das enfermidades cardiovasculares nos seres humanos do mundo desenvolvido.
O peixe cebra é un modelo útil para o xenotransplante de células cancerosas humanas e para os estudos in vivo da toxicidade de diferentes compostos quimioterapéuticos. En comparación co modelo murino, o modelo de peixe cebra é máis rápido, pode analizarse mediante métodos de alto rendemento e ten un menor custo de mantemento, o que fai posible e accesible crear terapias personalizadas.
Aínda que se desenvolveron varios métodos para determinar a proliferación celular baseados na adquisición e cuantificación de imaxes, persisten algúns inconvenientes. Na técnica de xenotransplante, a cuantificación da proliferación celular in vivo é fundamental para estandarizar o proceso de cara a futuras aplicacións preclínicas do modelo.
**ZFTool pode establecer un limiar de referencia que elimina a autofluorescencia do embrión e mide a área das células marcadas (GFP) e a intensidade desas células para definir un índice de proliferación.**